β-1,3-1,6-グルカンの含有量の測り方（新規定量法：特許）

はじめに。

これまでβ-1,3-1,6-グルカンの含有量は測定することができませんでしたが、特許技術により測定が可能になっています。その新規測定法について解説します。

まずは、従来のβ-グルカンの定量法からおさらい。

１．α-グルカンの除去

検体を酵素処理し、α-グルカンだけを分解したのち、沈殿により検体からα-グルカンを取り除きます。

２．β-グルカンの総量を測定

α-グルカンを除去した検体を、硫酸でグルコースの状態まで分解します。生じたグルコースの量からβ-グルカンの総量を計算します。

なぜ、β-グルカンの総量しか量れないのか。

硫酸でグルコースの状態にまで分解するときに、すべてのβ-グルカンが分解されてしまうからです。つまり、β-1,3-1,6-グルカンを特異的に分解することができれば、β-1,3-1,6-グルカンの量を測定することができるということになります。

β-1,3-1,6-グルカンだけを分解するには２つの酵素が必要。

β-1,3-1,6-グルカンは、β-1,3結合とβ-1,6結合にてグルコースが連結した物質であり、構成しているグルコース量を測定するためには、この２種類のβ-結合を加水分解する必要があります。

他の結合を分解せずβ-1,3-1,6-グルカンのみの量を測定するためには、β-1,3結合を特異的に分解する酵素であるβ-1,3グルカナーゼと、β-1,6グルカナーゼの両方が必要となります。

参考

条件を満たす分解酵素の発見。

上記の条件を満たしいていたのが、新たに土壌中より単離したCeriporiopsis sp. の１菌株が産生するβ-グルカナーゼでした。この菌は、菌体外にβ-1,3-グルカナーゼとβ-1,6-グルカナーゼの両方を分泌し、この両酵素をβ-1,3-1,6-グルカンに反応させると完全にグルコースまで分解されることが示されました。

酵素反応によって加水分解され、生じたグルコースを定量することで、 β-1,3-1,6-グルカンを直接測定することが可能となりました。

１．α-グルカンの除去

上記の従来法と同じ原理で、α-グルカンのみを除去します。

２．β-グルカンの総量を測定

従来法とは異なり、β-1,3-1,6-グルカンのみを分解できるので、それにより生じたグルコースの量を測定することでβ-1,3-1,6-グルカンのみの量を定量することができます。

新規定量法は特許技術。

β-1,3-1,6-グルカンが正確に測定されたβ-グルカンは、ソフィβ-グルカンだけであり、市場に存在するβ-グルカン商品の中で含有量を信用できるのはソフィβ-グルカンの商品だけであるということになります。